细菌基因敲除检测

时间2026-08-20 14:48:15 阅读 来源中析研究所

中析研究所检测中心专注细菌敲除检测领域,可检测大肠杆菌敲除菌株、金黄色葡萄球菌敲除菌株、铜绿假单胞菌敲除菌株、肺炎克雷伯菌敲除菌株、鲍曼不动杆菌敲除菌株、沙门氏菌敲除菌株、志贺氏菌敲除菌株等22+项。旗下实验室具备CMA、CNAS、ISO等检验资质,报告全国通用。

检测信息(部分)

细菌敲除检测是通过分子生物学技术对细菌特定进行定向删除或失活后的验证分析过程。该检测服务主要用于验证敲除菌株构建是否成功,评估功能缺失对细菌生理特性的影响,为微生物学基础研究、药物靶点筛选、病原菌致病机制分析等领域提供重要的实验数据支撑。检测过程涵盖型鉴定、表型分析、生长特性评估等多个维度,确保实验结果的准确性和可重复性。

检测仪器(部分)

  • PCR扩增仪
  • 实时荧光定量PCR仪
  • 凝胶成像系统
  • 电泳仪
  • 紫外分光光度计
  • 微量分光光度计
  • 高速离心机
  • 超低温冰箱
  • 生物安全柜
  • 恒温培养箱
  • 振荡培养箱
  • 酶标仪
  • 流式细胞仪
  • 激光共聚焦显微镜

检测方法(部分)

  • PCR验证法
  • Sanger测序法
  • 琼脂糖凝胶电泳
  • 实时荧光定量PCR
  • Western blot印迹
  • 菌落PCR快速鉴定
  • 限制性酶切分析
  • 脉冲场凝胶电泳
  • 生长曲线比浊法
  • 平板计数法
  • 生物膜结晶紫染色法
  • 药物敏感性纸片法

检测项目(部分)

  • 目的缺失验证:确认目标是否成功敲除
  • PCR扩增鉴定:检测敲除区域的DNA片段变化
  • 测序验证:通过Sanger测序确认序列改变
  • 敲除效率分析:评估敲除的完成程度
  • 生长曲线测定:比较野生型与敲除菌株生长差异
  • 菌落形态观察:记录敲除后的表型变化
  • 耐药性检测:分析缺失对抗生素敏感性的影响
  • 代谢能力测试:评估关键代谢功能变化
  • 生物膜形成能力:检测敲除对生物膜的影响
  • 运动性检测:分析鞭毛相关敲除后的运动能力
  • 毒力因子表达:检测致病敲除后的毒力变化
  • 应激反应测试:评估氧化应激、酸应激等耐受性
  • 细胞黏附能力:分析黏附相关功能
  • 蛋白质表达分析:通过Western blot检测蛋白缺失
  • 转录水平检测:利用qPCR分析表达变化
  • 酶活性测定:检测代谢酶相关敲除影响
  • 细胞壁完整性:分析细胞壁合成功能
  • 膜通透性检测:评估膜蛋白敲除效果
  • 群体感应分析:检测信号分子相关变化
  • 孢子形成能力:评估芽孢形成相关功能
  • 色素产生检测:分析色素合成敲除影响

检测范围(部分)

  • 大肠杆菌敲除菌株
  • 金黄色葡萄球菌敲除菌株
  • 铜绿假单胞菌敲除菌株
  • 肺炎克雷伯菌敲除菌株
  • 鲍曼不动杆菌敲除菌株
  • 沙门氏菌敲除菌株
  • 志贺氏菌敲除菌株
  • 李斯特菌敲除菌株
  • 枯草芽孢杆菌敲除菌株
  • 结核分枝杆菌敲除菌株
  • 幽门螺杆菌敲除菌株
  • 霍乱弧菌敲除菌株
  • 变形杆菌敲除菌株
  • 肠球菌敲除菌株
  • 链球菌敲除菌株
  • 嗜血杆菌敲除菌株
  • 奈瑟菌敲除菌株
  • 军团菌敲除菌株
  • 布鲁氏菌敲除菌株
  • 假单胞菌敲除菌株
  • 气单胞菌敲除菌株
  • 不动杆菌敲除菌株

检测标准(部分)

序号 标准号 标准名称 类别 发布日期 CCS分类 ICS分类
1 DB21/T 2872-2017 细菌常见主要耐药基因检测技术 (CN-DB21)辽宁省地方标准 2017-11-16 B41动物检疫、兽医与疫病防治 11.220兽医学
2 DB37/T 4415-2021 β-乳球蛋白基因敲除奶牛的鉴定及牛奶中β-乳球蛋白的检测技术 (CN-DB37)山东省地方标准 2021-10-18 X04基础标准与通用方法 67.050食品试验和分析的一般方法
3 DB37/T 3997-2020 细菌耐药基因blaNDM常见亚型的环介导等温扩增检测技术 (CN-DB37)山东省地方标准 2020-06-08 B41动物检疫、兽医与疫病防治 11.220兽医学
4 ISO 23418:2022 Microbiology of the food chain — Whole genome sequencing for typing and genomic characterization of bacteria — General requirements and guidance (IX-ISO)国际标准化组织 2022-06-09   07.100.30食品微生物学
5 DIN EN ISO 23418:2022-09 Microbiology of the food chain - Whole genome sequencing for typing and genomic characterization of bacteria - General requirements and guidance (ISO 23418:2022) (DE-DIN)德国标准化学会 2022-09-01    
6 SN/T 4075-2014 水稻细菌性条斑病菌、柑桔溃疡病菌、甘蓝黑腐病菌的基因芯片筛查方法 (CN-SN)行业标准-商品检验 2014-11-19 B16植物检疫、病虫害防治 07.080生物学、植物学、动物学
7 KS H 1208-2006(2016) 유산균의 항생제 내성과 유해효소 유전자 검출기법 (KR-KS)韩国标准 2006-12-21   07.100微生物学
8 T/CRHA 305-2026 第三代纳米孔宏基因组选择性测序病原细菌快速检测方法 (CN-TUANTI)团体标准 2026-05-15 C05医学  
9 EN ISO 23418:2022 Microbiology of the food chain - Whole genome sequencing for typing and genomic characterization of bacteria - General requirements and guidance (ISO 23418:2022) (IX-CEN)欧洲标准化委员会 2022-06-22 C50/64卫生 07.100.30食品微生物学
10 AWWA WQTC63957 Secondary Treatment of Waste Waters as Redistributors of Resistance Genes in Bacteria: Analysis and Risk Assessment (US-AWWA)美国给水工程协会 2006-11-01    
11 DIN EN ISO 23418:2020-10 Microbiology of the food chain - Whole genome sequencing for typing and genomic characterization of foodborne bacteria - General requirements and guidance (ISO/DIS 23418:2020); German and English version prEN ISO 23418:2020 (DE-DIN)德国标准化学会 2020-10-01   07.100微生物学

总结

细菌敲除检测是微生物功能组学研究的重要技术手段,通过系统的检测验证流程,能够准确判断敲除菌株的构建效果和生物学特性变化。该检测服务为科研人员提供了可靠的实验数据,有助于深入理解细菌功能、致病机制以及开发新型抗菌策略。检测过程遵循标准化操作规范,确保结果的可信度和可重复性,满足基础研究和应用开发的多层次需求。

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